
شامل موارد تهیه مولرهینتون آگار، سوسپانسیون میکروبی، شرایط آزمایش، تلقیح،
استانداردهای زمان و دمای انکوباسیون، خواندن و تفسیر نتایج
بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی و تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی به روش TEST-E میشود.
مقدمه: یکی از مهمترین وظایف آزمایشگاه میکروبشناسی تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی در باکتریهای جدا شده از عفونتهای بیماران میباشد. این مهمترین گام آزمایشگاه جهت کمک به پزشکان در مداوای بیماران است.
آزمایش کربی بائر یا انتشار از دیسک یکی از روشهای استاندارد شده برای تعیین حساسیت یا مقاومت باکتریهای پاتوژن هوازی و بیهوازی اختیاری به انواع عوامل ضد میکروبی است. این تست در آزمایشگاههای تشخیص بالینی به منظور ارائه اطلاعات به پزشکان برای درمان صحیح بیماران مبتلا به عفونت خاص میباشد. ارگانیسمهای پاتوژن بر روی محیط کشت مولر هینتون آگار در حضور دیسک های فیلتری کاغذی رشد کرده، وجود یا عدم رشد در اطراف دیسکها به طور غیر مستقیم توانایی عوامل ضد میکروبی در مهار رشد ارگانیسمها را نشان میدهد.
قرار دادن دیسکها روی پلیت با دستگاه
قرار دادن دیسک ها بر روی پلیت با دستگاه
دیسکها را میتوان با دیسپنسرهای مخصوص به صورت اتوماتیک بر روی پلیت قرار داد.
مولر هینتون آگار
مولر هینتون آگار استاندارد ترین محیط کشت برای آزمایش تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی است، برای اغلب باکتریها کاربرد داشته و با اضافه کردن مکملهای مورد نیاز جهت ارگانیسمهای سخت رشد نیز کاربرد دارد. عمق آگار باید ۴ میلیمتر باشد و سطح آن صاف و بدون شیب باشد اگر ضخامت آگار کم باشد قطر هاله ایجاد شده زیاد می شود و اگر ضخامت آگار زیاد باشد قطر هاله کاهش می یابد.
تهیـه یـک غلظـت منـاسب از سوسپانسیـون میکـروبی
تهیـه یـک غلظـت منـاسب از سوسپانسیـون میکـروبی در آزمایش حساسیت آنتی بیوتیکی بسیار مهم است. دو فاکتور مهم در این مورد شامل: کشت خالص و غلظت استاندارد میکروبی معادل کدورت نیم مک فارلند میباشد (برای باکتریهای موکوئیدی ۱ مک فارلند تهیه می شود). کدورت تهیه شده را می توان با نیم مک فارلند در کنار یک صفحه سفید با خطوط سیاه رنگ مورد مقایسه قرار داد.
در صورتیکه سوسپانسیون میکروبی غلظت مناسبی نداشت میتوان با رقیق کردن یا اضافه کردن کلنیهای میکروبی کدورت آن را با نیم مک فارلند یکسان نمود.